專題25 細(xì)胞工程【5年高考】考點(diǎn)一 植物細(xì)胞工程1.(2019江蘇單科,20,2分)為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力,某研究小組的實(shí)驗(yàn)過程如圖。下列敘述正確的是( )A.過程①獲得的原生質(zhì)體需懸浮在30%蔗糖溶液中B.過程②需提高生長(zhǎng)素的比例以促進(jìn)芽的分化C.過程③需用秋水仙素處理誘導(dǎo)細(xì)胞壁再生D.原生質(zhì)體雖無(wú)細(xì)胞壁但仍保持細(xì)胞的全能性答案 D 2.(2018江蘇單科,8,2分)花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。如圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖,下列敘述正確的是 ( )A.為了防止微生物污染,過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30minB.過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化C.過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體D.過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上答案 C 3.(2019課標(biāo)全國(guó)Ⅲ,38,15分)培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗,獲得試管苗的過程如圖所示。回答下列問題。(1)利用胡蘿卜根段進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植株,這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有 。?(2)步驟③切取的組織塊中要帶有形成層,原因是 。?(3)從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基,其原因是 。在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過細(xì)胞的 過程,最終可形成試管苗。?(4)步驟⑥要進(jìn)行照光培養(yǎng),其作用是 。?(5)經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株,一般可保持原品種的 ,這種繁殖方式屬于 繁殖。?答案 (1)全能性(或答:形成完整植株所需的全部基因) (2)形成層容易誘導(dǎo)形成愈傷組織 (3)誘導(dǎo)愈傷組織形成和誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗所需的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同 分化(或答:再分化) (4)誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用 (5)遺傳特性 無(wú)性4.(2017海南單科,31,15分)甲、乙兩名同學(xué)分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料,利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物?；卮鹣铝袉栴}:(1)以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體,在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng),均能獲得試管苗,其原理是 。?
(2)甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中,均加入一定量的蔗糖,蔗糖水解后可得到 。若要用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培養(yǎng)獲得幼苗,該細(xì)胞應(yīng)具備的條件是 (填“具有完整的細(xì)胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”)。?(3)圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果,該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的,這兩種激素是 。A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng) 形成的。?(4)若該種植物是一種雜合體的名貴花卉,要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉,可用組織培養(yǎng)方法繁殖,在培養(yǎng)時(shí), (填“能”或“不能”)采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體,原因是 。?答案 (1)綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞具有全能性,在一定條件下能發(fā)育成完整的植株 (2)葡萄糖、果糖 具有完整的細(xì)胞核 (3)細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素 脫分化 (4)不能 對(duì)雜合體的植株來說,其體細(xì)胞的基因型相同,而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同。用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到花卉基因型不同于原植株考點(diǎn)二 動(dòng)物細(xì)胞工程 5.(2020天津,1,4分)在克隆哺乳動(dòng)物過程中,通常作為核移植受體細(xì)胞的是去核的( )A.卵原細(xì)胞B.初級(jí)卵母細(xì)胞C.次級(jí)卵母細(xì)胞D.卵細(xì)胞答案 C 6.(2019江蘇單科,23,3分)如圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT-),在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA,無(wú)法生長(zhǎng)。下列敘述正確的是(多選)( )A.可用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B.兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長(zhǎng)C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)答案 ACD 7.(2018江蘇單科,22,3分)如圖為細(xì)胞融合的示意圖,下列敘述正確的是(多選)( )
A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,需先去分化再誘導(dǎo)融合B.a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因答案 BC 8.(2020課標(biāo)全國(guó)Ⅰ,38,15分)為研制抗病毒A的單克隆抗體,某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程?；卮鹣铝袉栴}:(1)上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是 。?(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟: 。?(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于 ,使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是 。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是 。?(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖,可采用的方法有 (答出2點(diǎn)即可)。?答案 (1)誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞 (2)取小鼠甲脾臟剪碎,用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞,加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液 (3)選擇培養(yǎng)基 只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存 抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性 (4)將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖;將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)9.(2018課標(biāo)全國(guó)Ⅲ,38,15分)2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道,中國(guó)科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物進(jìn)行克隆,獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉栴}:(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程,核移植是指 。通過核移植方法獲得的克隆猴,與核供體相比,克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目 (填“減半”“加倍”或“不變”)。?(2)哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度 (填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植,其原因是 。?(3)在哺乳動(dòng)物核移植的過程中,若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體,通常,所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目 (填“相同”或“不同”),性染色體組合 (填“相同”或“不同”)。?答案 (1)將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核,移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞 不變 (2)小于 胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)(表現(xiàn))全能性相對(duì)容易 (3)相同 不同考點(diǎn)三 胚胎工程10.(2020山東,14,2分)經(jīng)遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞注入囊胚,通過胚胎工程的相關(guān)技術(shù)可以獲得具有不同遺傳特性的實(shí)驗(yàn)小鼠。下列說法錯(cuò)誤的是( )A.用促性腺激素處理雌鼠可以獲得更多的卵子B.體外受精前要對(duì)小鼠的精子進(jìn)行獲能處理C.胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量并在囊胚或原腸胚階段移植
D.遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞可以通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)獲得答案 C 11.(2017江蘇單科,11,2分)牛雄性胚胎中存在特異性H-Y抗原,可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y單克隆抗體,篩選胚胎進(jìn)行移植,以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是( )A.H-Y單克隆抗體由骨髓瘤細(xì)胞分泌B.應(yīng)選用原腸胚做雌雄鑒別C.鑒別后的雄性胚胎可直接做胚胎移植D.用H-Y抗原免疫母?？色@得相應(yīng)抗體答案 D 12.(2017江蘇單科,14,2分)下列關(guān)于小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述,錯(cuò)誤的是( )A.精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲能B.小鼠在特定光控周期條件下飼養(yǎng),注射相關(guān)激素有促進(jìn)超數(shù)排卵的作用C.分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì),因此發(fā)育成的個(gè)體沒有形態(tài)學(xué)差異D.注射到囊胚腔中的胚胎干細(xì)胞可以參與個(gè)體器官的發(fā)育答案 C 13.(2020海南單科,25,10分)某課題組用生物技術(shù)制備轉(zhuǎn)基因小鼠的過程,如圖所示?；卮鹣铝袉栴}。(1)通常把目的基因轉(zhuǎn)入雄原核而不是雌原核,從兩者形態(tài)差異上分析,原因是 。?(2)把桑椹(葚)胚植入假孕母鼠子宮前,需要對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定,目前最有效的方法是SRY-PCR法。操作的基本程序是:先從被測(cè)胚胎中取出幾個(gè)細(xì)胞,提取DNA,然后用位于Y染色體的性別決定基因,即SRY基因的一段堿基設(shè)計(jì) ,以胚胎細(xì)胞中的DNA作為模板,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,最后用SRY特異性探針檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物。出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)者,胚胎為 ;出現(xiàn)陰性反應(yīng)者,胚胎為 。?(3)若目的基因的表達(dá)產(chǎn)物是某種特定的蛋白質(zhì),檢測(cè)目的基因在子代轉(zhuǎn)基因小鼠中是否成功表達(dá),常用的分子檢測(cè)方法是 ,檢測(cè)的基本思路是 。?答案 (1)雄性原核較大,更容易容納外源DNA (2)引物 雄性小鼠 雌性小鼠 (3)抗原—抗體雜交技術(shù) 從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體(對(duì)抗體進(jìn)行同位素標(biāo)記)進(jìn)行抗原抗體雜交,如果出現(xiàn)雜交帶,表明目的基因已經(jīng)表達(dá)成功14.(2019江蘇單科,29,8分)利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細(xì)胞中,然后通過核移植技術(shù)培育基因編輯豬,可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。如圖為基因編輯豬培育流程,請(qǐng)回答下列問題:
(1)對(duì)1號(hào)豬使用 處理,使其超數(shù)排卵,收集并選取處在 時(shí)期的卵母細(xì)胞用于核移植。?(2)采集2號(hào)豬的組織塊,用 處理獲得分散的成纖維細(xì)胞,放置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),其中CO2的作用是 。?(3)為獲得更多基因編輯豬,可在胚胎移植前對(duì)胚胎進(jìn)行 。產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自 號(hào)豬。?(4)為檢測(cè)病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入4號(hào)豬并正常表達(dá),可采用的方法有 (填序號(hào))。?①DNA測(cè)序②染色體倍性分析③體細(xì)胞結(jié)構(gòu)分析④抗原—抗體雜交答案 (1)促性腺激素 減數(shù)第二次分裂中期 (2)胰蛋白酶(膠原蛋白酶) 維持培養(yǎng)液的pH (3)分割 2 (4)①④[教師專用題組]【5年高考】考點(diǎn)一 植物細(xì)胞工程1.(2020山東,13,2分)兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂,形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出,未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理,將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種,過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是( )A.過程①需使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞B.過程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂C.過程③中常用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合D.耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段答案 C 分析題圖可知,①過程是去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁,該過程需要使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞,A正確;結(jié)合題干信息分析,過程②的目的是使中間偃麥草原生質(zhì)體中的染色體發(fā)生斷裂,斷裂后的染色體片段可能能保留在雜種植株中,從而可能培養(yǎng)出耐鹽小麥,B正確;過程③是原生質(zhì)體融合的過程,該過程必須借助一定的技術(shù)手段進(jìn)行人工誘導(dǎo),而人工誘導(dǎo)的方法有物理法和化學(xué)法,滅活的病毒用于動(dòng)物細(xì)胞融合,C錯(cuò)誤;結(jié)合題干信息和題圖中②的處理,可推斷耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段,D正確。2.(2013江蘇單科,11,2分)某種極具觀賞價(jià)值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植,可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗,下列技術(shù)中不能選用的是( )A.利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗B.采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗C.采集幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上D.采用幼葉、莖尖等部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)答案 B 本題考查對(duì)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗的多種技術(shù)手段的分析。為了使優(yōu)質(zhì)苗的生物性狀不發(fā)生性狀分離,可采用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗,也可采用將幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上的方法或用莖尖或幼葉等部位的組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗;花粉粒是減數(shù)分裂的產(chǎn)物,利用花粉粒離體培養(yǎng)得到的是單倍體苗,其高度不育,且會(huì)發(fā)生性狀分離,因此B項(xiàng)方案不能選用?！ ?3.(2012廣東理綜,2,4分)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是( )A.組織培養(yǎng)B.細(xì)胞雜交C.顯微注射D.核移植答案 A 本題主要考查現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)。由于植物分生組織中病毒很少或沒有病毒,常用莖尖通過組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒苗;細(xì)胞雜交通常用于培育雜種個(gè)體;顯微注射技術(shù)常用于基因工程,培育轉(zhuǎn)基因生物;核移植技術(shù)常用于培養(yǎng)克隆動(dòng)物。故只有A選項(xiàng)符合題意。4.[2020浙江7月選考,29(二),9分]回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題:(1)天然農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上存在著一段DNA片段(T-DNA),該片段可轉(zhuǎn)移并整合到植物細(xì)胞染色體上。為便于轉(zhuǎn)基因植物在組織培養(yǎng)階段的篩選,設(shè)計(jì)重組Ti質(zhì)粒時(shí),應(yīng)考慮T-DNA中要有可表達(dá)的目的基因,還需要有可表達(dá)的 。?(2)結(jié)合植物克隆技術(shù)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn),為獲得轉(zhuǎn)基因植株,農(nóng)桿菌侵染的宿主一般要選用具有優(yōu)良性狀、較高的遺傳穩(wěn)定性、 及易被農(nóng)桿菌侵染等特點(diǎn)的植物材料。若植物材料對(duì)農(nóng)桿菌不敏感,則可用 的轉(zhuǎn)基因方法。?(3)利用帶側(cè)芽的莖段獲得叢狀苗的過程與利用莖段誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織再獲得叢狀苗的過程相比,前者總培養(yǎng)時(shí)間 ,且不經(jīng)歷 過程,因而其遺傳性狀穩(wěn)定,是大多數(shù)植物快速繁殖的常用方法。?(4)與發(fā)芽培養(yǎng)基相比,配制轉(zhuǎn)基因叢狀苗生根培養(yǎng)基時(shí),可根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)添加 ,促進(jìn)叢狀苗基部細(xì)胞分裂形成愈傷組織并進(jìn)一步分化形成 ,最終形成根。還可通過改變MS培養(yǎng)基促進(jìn)生根,如 (A.提高蔗糖濃度 B.降低培養(yǎng)基濃度 C.提高大量元素濃度 D.不添加瓊脂)。?答案 (1)抗性基因 (2)全能性表達(dá)充分 顯微注射 (3)短 脫分化 (4)生長(zhǎng)素 根的分生組織 B解析 (1)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因植物時(shí),為便于檢測(cè)Ti質(zhì)粒中的T-DNA片段是否成功導(dǎo)入植物細(xì)胞,T-DNA中既要有可表達(dá)的目的基因,也要有可表達(dá)的抗性基因。(2)為獲得轉(zhuǎn)基因植株,農(nóng)桿菌侵染的宿主一般要選用易被農(nóng)桿菌侵染,同時(shí)性狀優(yōu)良、具有較高的遺傳穩(wěn)定性和全能性表達(dá)充分的植物材料。轉(zhuǎn)基因植株培育中,還可采用顯微注射的方法導(dǎo)入目的基因。(3)利用帶側(cè)芽的莖段獲得叢狀苗的過程不經(jīng)歷愈傷組織階段,因此不經(jīng)歷脫分化的過程,其總培養(yǎng)時(shí)間較短。(4)與發(fā)芽培養(yǎng)基相比,生根培養(yǎng)基中可適當(dāng)添加生長(zhǎng)素,從而促進(jìn)叢狀苗基部細(xì)胞分裂形成愈傷組織并進(jìn)一步分化形成根的分生組織,最終形成根。還可通過降低MS培養(yǎng)基的濃度促進(jìn)生根,植物通過根的生長(zhǎng)從外界獲取更多養(yǎng)分。5.(2015天津理綜,7,15分)DHA對(duì)腦神經(jīng)發(fā)育至關(guān)重要。以A、B兩種單細(xì)胞真核藻為親本,利用細(xì)胞融合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻。兩種藻特性如下表。親本藻優(yōu)勢(shì)代謝類型生長(zhǎng)速率[g/(L·天)]固體培養(yǎng)基上藻落直徑DHA含量(‰)A藻自養(yǎng)0.06小0.7B藻異養(yǎng)0.14大無(wú)據(jù)表回答:(1)選育的融合藻應(yīng)具有A藻 與B藻 的優(yōu)點(diǎn)。?(2)誘導(dǎo)融合前需用纖維素酶處理兩種藻,其目的是獲得 。?(3)通過以下三步篩選融合藻,步驟 可淘汰B藻,步驟 可淘汰生長(zhǎng)速率較慢的藻落,再通過步驟 獲取生產(chǎn)所需的融合藻。?步驟a:觀察藻落的大小步驟b:用不含有機(jī)碳源(碳源——生物生長(zhǎng)的碳素來源)的培養(yǎng)基進(jìn)行光照培養(yǎng)步驟c:測(cè)定DHA含量(4)以獲得的融合藻為材料進(jìn)行甲、乙、丙三組試驗(yàn),結(jié)果如圖。
①甲組條件下,融合藻產(chǎn)生[H]的細(xì)胞器是 ;丙組條件下產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器是 。?②與甲、丙兩組相比,乙組融合藻生長(zhǎng)速率較快,原因是在該培養(yǎng)條件下 。?甲、乙兩組DHA產(chǎn)量均較高,但實(shí)際生產(chǎn)中往往采用甲組的培養(yǎng)條件,其原因是 。?答案 (1)產(chǎn)生DHA、自養(yǎng)特性 快速生長(zhǎng)(2)原生質(zhì)體 (3)b a c (4)①線粒體、葉綠體 線粒體?、谌诤显寮饶芄饽茏责B(yǎng)又能異養(yǎng) 融合藻利用光能和簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物即能生長(zhǎng),不需添加葡萄糖,可降低成本,也可防止雜菌生長(zhǎng)解析 (1)根據(jù)題干信息“利用細(xì)胞融合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻”及表中信息可推斷,融合藻應(yīng)既具有A藻的“自養(yǎng)”和“產(chǎn)DHA”的特點(diǎn),又具有B藻“快速生長(zhǎng)”的優(yōu)點(diǎn)。(2)誘導(dǎo)融合前需利用纖維素酶去掉兩種藻的細(xì)胞壁,從而獲得原生質(zhì)體。(3)由于B藻是異養(yǎng)生物,只能利用有機(jī)碳源,故通過步驟b可以淘汰B藻。由于A藻生長(zhǎng)慢、藻落小而B藻生長(zhǎng)快、藻落大,可以通過步驟a觀察藻落大小淘汰生長(zhǎng)速率較慢的藻落。最后通過步驟c測(cè)定DHA含量較高的藻落即為生產(chǎn)所需的融合藻。(4)①分析坐標(biāo)圖可知,甲組的融合藻既能進(jìn)行光合作用又能進(jìn)行呼吸作用,因此,產(chǎn)生[H]的細(xì)胞器有葉綠體和線粒體。丙組融合藻在黑暗中產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器是線粒體。②乙組融合藻既能利用光能又能利用葡萄糖,屬于既能光能自養(yǎng)又能異養(yǎng)的生物,因此乙組培養(yǎng)條件下融合藻較甲、丙兩組生長(zhǎng)快。實(shí)際生產(chǎn)中采用甲組的培養(yǎng)條件而不采用乙組培養(yǎng)條件的原因是:甲組融合藻在不添加葡萄糖的情況下就能利用光能和簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物生長(zhǎng),因此降低了成本,也可防止雜菌生長(zhǎng)。6.(2014江蘇單科,29,9分)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問題:(1)外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過程稱為 。?(2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如圖所示。細(xì)胞干重在12d后下降的原因有 ;培養(yǎng)液中蔗糖的作用是 、 。?(3)多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng) 處理,會(huì)產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測(cè)愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目,壓片前常用纖維素酶和 酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后,觀察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,合理的解釋是 、 。?(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,生產(chǎn)中采用植物細(xì)胞的固定化技術(shù),其原理與酵母細(xì)胞固定化類似。下列說法正確的有 (填序號(hào))。?
①選取旺盛生長(zhǎng)的愈傷組織細(xì)胞包埋②必須在光照條件下培養(yǎng)③培養(yǎng)過程中需通空氣④固定化后植物細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)變慢答案 (9分)(1)脫分化 (2)蔗糖濃度下降,pH降低 提供能源 調(diào)節(jié)滲透壓 (3)秋水仙素(低溫) 果膠 經(jīng)加倍到4n的細(xì)胞處于有絲分裂后期 經(jīng)加倍到8n的細(xì)胞處于有絲分裂中期 (4)①③④解析 (1)外植體經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。(2)分析坐標(biāo)曲線圖,可見12d后培養(yǎng)液中的蔗糖濃度已降至較低,pH也有所下降,因此使得細(xì)胞生命活動(dòng)受阻,細(xì)胞干重減小。培養(yǎng)液中的蔗糖可為培養(yǎng)的細(xì)胞提供能源,又可調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的滲透壓。(3)二倍體愈傷組織經(jīng)秋水仙素、低溫等人工誘導(dǎo)處理,可產(chǎn)生染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞。植物細(xì)胞之間除纖維素外,還存在果膠層,因此可利用纖維素酶和果膠酶解離愈傷組織。愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)人工誘導(dǎo)后,細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍成4n,染色體數(shù)為4n的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,處于有絲分裂后期的細(xì)胞中染色體數(shù)為8n;若加倍到4n的細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)后繼續(xù)加倍形成染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,這樣的細(xì)胞再進(jìn)行有絲分裂,在中期時(shí)會(huì)看到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞。(4)通過愈傷組織獲得次生代謝產(chǎn)物時(shí),需選擇生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞,由于植物細(xì)胞進(jìn)行需氧呼吸,培養(yǎng)過程需通入空氣。愈傷組織細(xì)胞沒有葉綠體,不進(jìn)行光合作用,不需光照。植物細(xì)胞固定化后,與外界環(huán)境的物質(zhì)交換能力降低,生長(zhǎng)變慢。7.(2013天津理綜,9,15分)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題:(1)過程①所需的酶是 。?(2)過程②后,在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的 存在,這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。?(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是 。原生質(zhì)體經(jīng)過 再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。?(4)若分析再生植株的染色體變異類型,應(yīng)剪取再生植株和 植株的根尖,通過 、 、染色和制片等過程制成裝片,然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。?(5)采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到兩親本的差異性條帶,可用于雜種植株的鑒定。如圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株1~4進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷,再生植株1~4中一定是雜種植株的有 。?(6)對(duì)雜種植株進(jìn)行 接種實(shí)驗(yàn),可篩選出具有高抗性的雜種植株。?答案 (1)纖維素酶和果膠酶 (2)葉綠體 (3)保持原生質(zhì)體完整性 細(xì)胞壁 (4)雙親(或花椰菜和黑芥) 解離 漂洗 (5)1、2、4 (6)黑腐病菌解析 (1)去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體需要用纖維素酶和果膠酶處理。(2)根細(xì)胞不含葉綠體,葉肉細(xì)胞含有葉綠體,因此通過PEG誘導(dǎo)融合的雜種細(xì)胞應(yīng)含有葉綠體,以此作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。
(3)原生質(zhì)體失去了細(xì)胞壁的保護(hù)作用,因此原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇,使原生質(zhì)體處于等滲溶液中,以維持原生質(zhì)體正常形態(tài)。原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)要判斷染色體變異的類型,應(yīng)剪取再生植株、花椰菜和黑芥植株的根尖,通過解離、漂洗、染色、制片等過程制成裝片,然后進(jìn)行顯微觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。(5)根據(jù)兩親本的差異性條帶,可知再生植株1、2和4既有花椰菜的條帶,又有黑芥的條帶,因此再生植株1、2和4一定為雜種植株。(6)要篩選出高抗性的雜種植株,應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的病原體接種實(shí)驗(yàn),即接種黑腐病菌。8.(2012課標(biāo),39,15分)為了探究6-BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響,某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6-BA和IAA,配制成四種培養(yǎng)基(見下表),滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長(zhǎng)狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體,在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后,統(tǒng)計(jì)再生叢芽外植體的比率(m),以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n),結(jié)果如下表。培養(yǎng)基編號(hào)濃度/mg·L-1m/%n/個(gè)6-BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0回答下列問題:(1)按照植物的需求量,培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽的元素可分為 和 兩類。上述培養(yǎng)基中,6-BA屬于 類生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。?(2)在該實(shí)驗(yàn)中,自變量是 ,因變量是 ,自變量的取值范圍是 。?(3)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是 號(hào)培養(yǎng)基。?(4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根,培養(yǎng)基中一般不加入 (填“6-BA”或“IAA”)。?答案 (1)大量元素 微量元素 細(xì)胞分裂素 (2)IAA濃度 再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n) 0~0.5mg·L-1 (3)1 (4)6-BA解析 本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。(1)植物組織培養(yǎng)常用MS培養(yǎng)基,其中,無(wú)機(jī)鹽的元素可分為大量元素和微量元素兩類,前者如N、P、K、Ca、Mg、S等,后者如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo等。MS培養(yǎng)基中還常需要添加能誘導(dǎo)細(xì)胞分裂、脫分化、再分化的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,常用的生長(zhǎng)素有2,4-D、IAA、NAA等,常用的細(xì)胞分裂素有6-BA、KT等。(2)該實(shí)驗(yàn)中,各組6-BA濃度均為0.5mg·L-1,IAA的濃度不相同,故自變量為IAA濃度,IAA濃度范圍為0~0.5mg·L-1。據(jù)表可知,該實(shí)驗(yàn)因變量是再生叢芽外植體的比率(m)以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)。(3)由表格中的數(shù)據(jù)可知,1號(hào)培養(yǎng)基誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少。(4)生長(zhǎng)素常用于誘導(dǎo)細(xì)胞分裂和根的分化,6-BA一般用于誘導(dǎo)植物的愈傷組織分化出叢芽,故誘導(dǎo)菊花試管苗生根,培養(yǎng)基中一般不加入6-BA?？键c(diǎn)二 動(dòng)物細(xì)胞工程9.(2014浙江理綜,3,6分)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是( )A.連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型B.某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C.由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀答案 B 連續(xù)細(xì)胞系是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系,大多數(shù)具有異倍體核型,A錯(cuò)誤;癌細(xì)胞在合適條件下可以發(fā)生不定向的基因突變而逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞,B正確;由一個(gè)單細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆,C錯(cuò)誤;未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系具有異質(zhì)性,D錯(cuò)誤。10.(2013重慶理綜,2,6分)如圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述,正確的是( )
A.①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B.②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C.③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D.④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群答案 D 本題主要考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)。①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的漿細(xì)胞;②中使用聚乙二醇或滅活的病毒等,有利于雜交瘤細(xì)胞的形成;③同時(shí)具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性;④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群。故D項(xiàng)正確。11.(2017課標(biāo)全國(guó)Ⅲ,38,15分)編碼蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五個(gè)片段組成,編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成,如圖1所示。回答下列問題:(1)現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙,若在啟動(dòng)子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),則所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙,原因是 。?(2)某同學(xué)在用PCR技術(shù)獲取DNA片段B或D的過程中,在PCR反應(yīng)體系中加入了DNA聚合酶、引物等,還加入了序列甲作為 ,加入了 作為合成DNA的原料。?(3)現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白,要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用,某同學(xué)做了如下實(shí)驗(yàn):將一定量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組,其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一組作為對(duì)照,培養(yǎng)并定期檢測(cè)T淋巴細(xì)胞濃度,結(jié)果如圖2。①由圖2可知:當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí),添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加,此時(shí)若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖,可采用的方法是 。細(xì)胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度,CO2的作用是 。?②僅根據(jù)圖1、圖2可知,上述甲、乙、丙三種蛋白中,若缺少 (填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所編碼的肽段,則會(huì)降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。?答案 (1)編碼乙的DNA序列起始端無(wú)ATG,轉(zhuǎn)錄出的mRNA無(wú)起始密碼子 (2)模板 dNTP (3)①進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng) 維持培養(yǎng)液的pH?、贑解析 本題借助圖示模型考查基因工程技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)知識(shí),考查考生針對(duì)特定生物學(xué)問題,運(yùn)用模型與建模要素、演繹與推理要素等科學(xué)思維素養(yǎng)分析圖示及曲線并展開探討的能力。(1)由題干中編碼蛋白乙的DNA序列可知,編碼乙的DNA序列起始端無(wú)ATG,轉(zhuǎn)錄出的mRNA上沒有起始密碼子AUG。(2)PCR需要的條件包括引物、耐高溫的DNA聚合酶、DNA模板、四種游離的脫氧核苷酸等。(3)①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞具有貼壁生長(zhǎng)以及接觸抑制的特點(diǎn),當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí),若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖,需要在培養(yǎng)基中加入胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞并分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng);動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,需要在培養(yǎng)箱中通入一定濃度的CO2,CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。②由圖2可知,加入蛋白丙刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果明顯比加入蛋白甲、乙時(shí)低;結(jié)合圖1
中編碼蛋白丙與蛋白甲、乙的DNA序列可知,缺少C片段所編碼的肽段,會(huì)明顯降低蛋白刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。12.(2016課標(biāo)全國(guó)Ⅱ,40,15分)如圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程?；卮鹣铝袉栴}:(1)圖中A表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為2n,則其性染色體的組成可為 。過程①表示去除細(xì)胞核,該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行,去核時(shí)常采用 的方法。②代表的過程是 。?(2)經(jīng)過多次傳代后,供體細(xì)胞中 的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此,選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。?(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是 。?(4)與克隆羊“多莉(利)”培育成功一樣,其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了 。?答案 (1)XX或XY 顯微操作 胚胎移植 (2)遺傳物質(zhì) (3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響 (4)動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性解析 本題通過問題遞進(jìn)的命題方式考查動(dòng)物克隆的原理與操作,屬于對(duì)歸納與概括、演繹與推理等科學(xué)思維素養(yǎng)的考查。(1)因供體的性別不確定,故其細(xì)胞核內(nèi)的性染色體組成為XX或XY;一般將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到MⅡ中期,用顯微操作法將其細(xì)胞核去除;②代表的過程是胚胎移植。(2)通常傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞可以保持正常的二倍體核型,超過10代以后,供體細(xì)胞中遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性會(huì)降低。(3)克隆動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀會(huì)產(chǎn)生影響。(4)克隆動(dòng)物的成功可以證明動(dòng)物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。13.(2014課標(biāo)全國(guó)Ⅰ,40,15分)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目為40條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè),得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞?；卮鹣铝袉栴}:(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過 次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是 小鼠,理由是 。?(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有 ,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是 。?(3)雜交瘤細(xì)胞中有 個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是 條(不考慮有點(diǎn)分裂)。?(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是 。?答案 (1)4 Y Y小鼠的血清抗體效價(jià)最高
(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞 細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%(3)1 100(4)不能無(wú)限增殖解析 (1)分析題圖可知,經(jīng)4次免疫后,小鼠Y的血清抗體效價(jià)就可達(dá)到16000以上。三只免疫小鼠達(dá)到要求后,Y小鼠的血清抗體效價(jià)最高,故最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)中,由于細(xì)胞融合是隨機(jī)的,而且誘導(dǎo)融合率不可能達(dá)到100%,所以會(huì)有未融合的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞、融合的具有同種核的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞三種類型。(3)雜交瘤細(xì)胞同時(shí)具有B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的核物質(zhì),但細(xì)胞核只有一個(gè)。由于雜交瘤細(xì)胞在分裂過程中染色體可能會(huì)丟失,故細(xì)胞核中染色體數(shù)目最多是40+60=100(條)。(4)B淋巴細(xì)胞已經(jīng)分化,沒有無(wú)限增殖的潛能。14.(2013海南單科,31,15分)單純皰疹病毒Ⅰ型(HSV-1)可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSV-1的單克隆抗體可快速檢測(cè)HSV-1?；卮鹣铝袉栴}:(1)在制備抗HSV-1的單克隆抗體的過程中,先給小鼠注射一種純化的HSV-1蛋白,一段時(shí)間后,若小鼠血清中抗 的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性,說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了 反應(yīng),再?gòu)男∈蟮摹 ≈蝎@取B淋巴細(xì)胞。將該B淋巴細(xì)胞與小鼠的 細(xì)胞融合,再經(jīng)過篩選、檢測(cè),最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞,該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是 。?(2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體,可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的 中使其增殖,再?gòu)摹 ≈刑崛 ⒓兓@得。?(3)通過上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HSV-1蛋白,其原因是該抗體具有 和 等特性。?答案 (15分)(1)HSV-1蛋白(1分) 體液免疫(1分,其他合理答案也給分) 脾臟(1分,其他合理答案也給分) 骨髓瘤(1分) 無(wú)限增殖且產(chǎn)生專一抗體(3分,其他合理答案也給分)(2)腹腔 腹水(每空2分,共4分)(3)純度高(2分) 特異性強(qiáng)(2分,其他合理答案也給分)解析 (1)制備單克隆抗體時(shí),需要先給小鼠注射特定抗原(HSV-1蛋白),當(dāng)小鼠血清中抗HSV-1蛋白的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性時(shí),就可從小鼠脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞,將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)過篩選和克隆化培養(yǎng),最終獲得既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞。(2)單克隆抗體的獲取有兩條途徑,一是從體外細(xì)胞培養(yǎng)液中提純獲得,二是將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖,再?gòu)母顾刑崛?、純化獲得。(3)單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、純度高等特點(diǎn)?？键c(diǎn)三 胚胎工程15.(2016江蘇單科,11,2分)印度沙漠貓是一種珍稀貓科動(dòng)物,通過胚胎工程技術(shù),可以讓家貓代孕而繁育,主要步驟如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是( )A.步驟甲、乙分別是指精子獲能、胚胎分割B.誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細(xì)胞C.受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營(yíng)養(yǎng)主要來源于培養(yǎng)液D.步驟甲使用的培養(yǎng)液和早期胚胎培養(yǎng)液成分基本相同答案 B 步驟甲、乙分別是體外受精和胚胎移植,A項(xiàng)錯(cuò)誤;誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素,該激素只作用于性腺細(xì)胞,B項(xiàng)正確;受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營(yíng)養(yǎng)主要來源于卵細(xì)胞,C項(xiàng)錯(cuò)誤;步驟甲使用的培養(yǎng)液(獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤?與早期胚胎培養(yǎng)液成分不完全相同,D項(xiàng)錯(cuò)誤。
解題關(guān)鍵 解答本題的關(guān)鍵在于理解試管動(dòng)物培養(yǎng)的過程、超數(shù)排卵的激素作用特點(diǎn)、早期胚胎培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來源以及幾種不同培養(yǎng)液的成分(獲能溶液、體外受精培養(yǎng)液、早期胚胎培養(yǎng)液)。16.(2014江蘇單科,2,2分)下列關(guān)于蛙胚胎發(fā)育過程的敘述,正確的是( )A.通過細(xì)胞分裂不斷增加細(xì)胞數(shù)量,并在一定時(shí)期發(fā)生細(xì)胞分化B.胚胎發(fā)育過程中細(xì)胞不斷分裂,但不發(fā)生凋亡C.隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增加,蛙胚的有機(jī)物總量不斷增加D.發(fā)育過程中蛙胚從環(huán)境中獲得的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)逐漸增加答案 A 蛙胚胎發(fā)育過程包括細(xì)胞分裂增加細(xì)胞數(shù)目和細(xì)胞分化產(chǎn)生形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能不同的細(xì)胞,A正確;在胚胎發(fā)育過程中,也存在著細(xì)胞凋亡,B錯(cuò)誤;蛙胚發(fā)育過程,細(xì)胞不斷進(jìn)行呼吸作用,消耗有機(jī)物,有機(jī)物總量不斷減少,C錯(cuò)誤;蛙胚在發(fā)育過程中從環(huán)境中獲得氧氣,但營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來自蛙胚本身,由于代謝不斷地被消耗而減少,D錯(cuò)誤。錯(cuò)因分析 本題錯(cuò)選答案高度集中在D選項(xiàng),主要原因可能是學(xué)生對(duì)卵生動(dòng)物胚胎發(fā)育過程,以及胚胎發(fā)育過程中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的來源不清楚。17.(2014江蘇單科,19,2分)杜泊羊以其生長(zhǎng)速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn),被稱為“鉆石級(jí)”肉用綿羊。科研工作者通過胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如圖所示,相關(guān)敘述正確的是( )A.為了獲得更多的卵母細(xì)胞,需用雌激素對(duì)雌性杜泊羊進(jìn)行處理B.從卵巢中采集的卵母細(xì)胞可直接與獲能的精子進(jìn)行體外受精C.為避免代孕綿羊?qū)χ踩肱咛ギa(chǎn)生排斥反應(yīng),應(yīng)注射免疫抑制劑D.為了進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖規(guī)模,可通過胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎答案 D 為了獲得更多的卵母細(xì)胞,需用促性腺激素對(duì)雌羊進(jìn)行處理,A錯(cuò)誤;從卵巢中采集的卵母細(xì)胞,都需要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后才能與獲能的精子受精,B錯(cuò)誤;代孕綿羊與供體綿羊?yàn)橥N動(dòng)物,所以代孕綿羊?qū)σ迫胱訉m的同種外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),C錯(cuò)誤;胚胎分割技術(shù)可提高胚胎的利用率,擴(kuò)大繁殖規(guī)模,D正確。疑難點(diǎn)撥?、贋榱双@得更多的卵母細(xì)胞,需要對(duì)雌性杜泊羊進(jìn)行超數(shù)排卵處理,而超數(shù)排卵處理注射的是外源促性腺激素。②從卵巢中采集的卵母細(xì)胞尚未成熟,需要培養(yǎng)至減數(shù)第二分裂中期才能與獲能精子進(jìn)行受精。③研究證明,受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生免疫反應(yīng),這是胚胎工程重要的生理學(xué)基礎(chǔ),因此無(wú)需給胚胎受體母羊注射免疫抑制劑。18.(2013江蘇單科,13,2分)軟骨發(fā)育不全為常染色體顯性遺傳病,基因型為HH的個(gè)體早期死亡。一對(duì)夫妻均為該病患者,希望通過胚胎工程技術(shù)輔助生育一個(gè)健康的孩子。下列做法錯(cuò)誤的是 ( )A.首先經(jīng)超排卵處理后進(jìn)行體外受精B.從囊胚中分離細(xì)胞,培養(yǎng)后檢測(cè)基因型C.根據(jù)檢測(cè)結(jié)果篩選基因型為hh的胚胎D.將胚胎培養(yǎng)至原腸胚期后移植到子宮答案 D 本題考查胚胎工程技術(shù)的具體應(yīng)用。體外受精時(shí)首先要利用相關(guān)激素處理雌性個(gè)體促進(jìn)其排出更多的卵子;由于該對(duì)夫婦均為軟骨發(fā)育不全患者,因此他們的孩子可能患病,也可能正常,因此應(yīng)從囊胚中分離細(xì)胞,培養(yǎng)后檢測(cè)其基因型,然后根據(jù)檢測(cè)結(jié)果選擇基因型為hh的胚胎進(jìn)行胚胎移植;進(jìn)行胚胎移植的最佳時(shí)期為桑椹胚期或囊胚期,原腸胚階段的細(xì)胞分而程度高,移植成功率低,所以一般不選用原腸胚期的胚胎進(jìn)行移植。解后反思 胚胎工程的知識(shí)點(diǎn)并不多,而且多為識(shí)記性知識(shí),理解起來并不難,只要考生踏實(shí)復(fù)習(xí),并將該知識(shí)點(diǎn)與前后有關(guān)內(nèi)容密切聯(lián)系,形成知識(shí)體系,就應(yīng)該有良好的學(xué)習(xí)效果。
19.(2012浙江理綜,2,6分)下列關(guān)于高等哺乳動(dòng)物受精與胚胎發(fā)育的敘述,正確的是( )A.絕大多數(shù)精卵細(xì)胞的識(shí)別具有物種特異性B.卵裂球細(xì)胞的體積隨分裂次數(shù)增加而不斷增大C.囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞具有發(fā)育全能性D.原腸胚發(fā)育分化形成內(nèi)外兩個(gè)胚層答案 A 此題考查受精作用與胚胎發(fā)育的相關(guān)知識(shí)。精卵細(xì)胞的識(shí)別具有物種特異性,卵細(xì)胞受精時(shí),一般只能接受同種生物的精子,A正確;受精卵開始的幾次卵裂,由于沒有接受外來營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),細(xì)胞數(shù)目雖在增加,但卵裂球細(xì)胞總體積并沒有增大,甚至略有減小,B錯(cuò)誤;囊胚由滋養(yǎng)層和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)組成,滋養(yǎng)層細(xì)胞沒有發(fā)育全能性,將來發(fā)育成胚胎的附屬結(jié)構(gòu)或胚外結(jié)構(gòu),內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞才具有發(fā)育全能性,C錯(cuò)誤;原腸胚已有外、中、內(nèi)三個(gè)胚層的分化,D錯(cuò)誤。20.(2012江蘇單科,9,2分)通過胚胎移植技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)良種牛的快速繁殖。下列相關(guān)敘述正確的是( )A.對(duì)供體和受體母牛都要進(jìn)行相同激素處理B.受精和胚胎的早期培養(yǎng)都需要在體外進(jìn)行C.對(duì)沖卵獲得的原腸胚檢查合格后方可移植D.胚胎分割移植實(shí)現(xiàn)同卵多胎的成功率較低答案 D 本題主要考查胚胎移植的有關(guān)問題。常用孕激素對(duì)受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理,對(duì)供體母牛還要注射促性腺激素做超數(shù)排卵處理,故A錯(cuò);受精和早期胚胎培養(yǎng)可在雌性動(dòng)物體內(nèi)完成,也可以在體外完成,故B錯(cuò);對(duì)沖卵獲得的桑椹胚或囊胚檢查合格后方可移植,故C錯(cuò);胚胎分割移植最常見的是同卵雙胎,而同卵多胎的成功率很小,故D對(duì)。21.(2011江蘇單科,18,2分)下列關(guān)于胚胎工程的敘述,錯(cuò)誤的是 ( )A.體外受精是指獲能的精子和成熟的卵子在相應(yīng)溶液中受精B.受精卵發(fā)育到原腸胚階段才能進(jìn)行胚胎移植C.早期胚胎培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需加入血清D.試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)答案 B 胚胎工程中,受精卵一般發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段進(jìn)行胚胎移植。22.(2011浙江理綜,2,6分)培育“試管山羊”的基本過程如下圖所示。若要培育成功,下列敘述正確的是( )受精卵早期胚胎代孕母羊試管山羊A.甲過程中可通過給母山羊注射有關(guān)激素使其超數(shù)排卵B.乙過程的目的之一是促進(jìn)卵母細(xì)胞和精子的成熟C.丙過程與乙過程中應(yīng)采用相同成分的培養(yǎng)液D.丁過程中早期胚胎須移植到與供體性狀相同的代孕母羊子宮內(nèi)答案 A 分析圖示可知,甲過程為卵母細(xì)胞的采集,一般用促性腺激素處理良種母山羊,使其超數(shù)排卵。乙過程為精子獲能以及受精,獲能的精子和成熟的卵子在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫?。丙過程為早期胚胎培養(yǎng),在發(fā)育培養(yǎng)液中進(jìn)行。丁過程是胚胎移植,是指將早期胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物子宮內(nèi)使之繼續(xù)發(fā)育。故A項(xiàng)正確。23.(2015山東理綜,36,12分)治療性克隆對(duì)解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義。流程如下:(1)過程①采用的是細(xì)胞工程中的 技術(shù),過程②采用的是胚胎工程中的 技術(shù)。?
(2)體細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí),所需氣體主要有O2和CO2,其中CO2的作用是維持培養(yǎng)液(基)的 。?(3)如果克隆過程中需進(jìn)行基因改造,在構(gòu)建基因表達(dá)載體(重組載體)時(shí)必須使用 和 兩種工具酶?；虮磉_(dá)載體上除目的基因外,還需有 基因,以便選出成功導(dǎo)入基因表達(dá)載體的細(xì)胞。?(4)胚胎干細(xì)胞可以來自囊胚中的 。在一定條件下,胚胎干細(xì)胞可以分化形成不同的組織器官。若將圖中獲得的組織器官移植給個(gè)體 (填“A”或“B”),則不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。?答案 (1)(體細(xì)胞)核移植 (早期)胚胎培養(yǎng) (2)pH(或酸堿度) (3)限制性(核酸)內(nèi)切酶(或限制酶) DNA連接酶(注:兩空可顛倒) 標(biāo)記 (4)內(nèi)細(xì)胞團(tuán) B解析 (1)圖中①過程采用的是體細(xì)胞核移植技術(shù);過程②為重組細(xì)胞經(jīng)胚胎培養(yǎng)發(fā)育至早期胚胎的過程,利用了(早期)胚胎培養(yǎng)技術(shù)。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),氣體環(huán)境為95%的空氣和5%的CO2,CO2的作用是維持培養(yǎng)液(基)的pH。(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),需用的工具酶為限制酶和DNA連接酶?；虮磉_(dá)載體上除目的基因外,還需要有標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子等。標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。(4)囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)具有發(fā)育的全能性,可以作為胚胎干細(xì)胞的來源。通過核移植技術(shù)獲得的組織器官若移植給核供體,則不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。解題關(guān)鍵 識(shí)別題圖中胚胎工程各步驟的名稱是解答本題的關(guān)鍵。24.(2015重慶理綜,8,20分)某課題組為解決本地奶牛產(chǎn)奶量低的問題,引進(jìn)了含高產(chǎn)奶基因但對(duì)本地適應(yīng)性差的純種公牛。(1)擬進(jìn)行如下雜交:♂A(具高產(chǎn)奶基因的純種)×♀B(具適宜本地生長(zhǎng)基因的純種)→C選擇B作為母本,原因之一是胚胎能在母體內(nèi)正?！ Ｈ鬋中的母牛表現(xiàn)為適宜本地生長(zhǎng),但產(chǎn)奶量并未提高,說明高產(chǎn)奶是 性狀。為獲得產(chǎn)奶量高且適宜本地生長(zhǎng)的母牛,根據(jù)現(xiàn)有類型,最佳雜交組合是 ,后代中出現(xiàn)這種母牛的概率是 (假設(shè)兩對(duì)基因分別位于不同對(duì)常染色體上)。?(2)用以上最佳組合,按以下流程可加速獲得優(yōu)良個(gè)體。精子要具有受精能力,需對(duì)其進(jìn)行 處理;卵子的成熟在過程 中完成。在過程④的培養(yǎng)基中含有葡萄糖,其作用是 。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛,過程⑤前應(yīng)鑒定胚胎的 。子代母牛的優(yōu)良性狀與過程 的基因重組有關(guān)。?(3)為了提高已有胚胎的利用率,可采用 技術(shù)。?答案 (20分)(1)生長(zhǎng)發(fā)育或胚胎發(fā)育 隱性 ♂A×♀C 1/8 (2)獲能或增強(qiáng)活力?、邸」┠堋⌒詣e、高產(chǎn)奶和適應(yīng)生長(zhǎng)的基因 ② (3)胚胎分割解析 (1)由于B是具有適宜本地生長(zhǎng)基因的純合子,故選擇B作為母本,可使胚胎在母體內(nèi)正常生長(zhǎng)發(fā)育。讓B與純合的具有高產(chǎn)奶基因的A雜交得到C,C中的母牛的產(chǎn)奶量并未提高,可推知高產(chǎn)奶是隱性性狀,而C為雜合子。因引進(jìn)的是含高產(chǎn)奶基因的純種公牛,故可選用♂A×♀C雜交組合,后代中高產(chǎn)奶且適宜本地生長(zhǎng)的母牛的概率為1/2×1/2×1/2=1/8。(2)精子需進(jìn)行獲能處理,才能具有受精能力。卵子的成熟在受精過程(過程③)中完成。胚胎培養(yǎng)中,葡萄糖的作用是提供能量。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛,在胚胎移植前應(yīng)鑒定胚胎的性別、高產(chǎn)奶和適應(yīng)生長(zhǎng)的基因。經(jīng)過過程②的基因重組產(chǎn)生同時(shí)含有高產(chǎn)奶基因和適應(yīng)本地生長(zhǎng)基因的卵細(xì)胞,是后代出現(xiàn)高產(chǎn)奶且適宜本地生長(zhǎng)母牛的前提。(3)可通過胚胎分割技術(shù)提高已有胚胎的利用率。25.(2014福建理綜,33,10分)Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞。科研人員利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖:
(1)步驟①中,在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的 。?(2)步驟②中,重組胚胎培養(yǎng)到 期時(shí),可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞。?(3)步驟③中,需要構(gòu)建含有Rag2基因的表達(dá)載體?？梢愿鶕?jù)Rag2基因的 設(shè)計(jì)引物,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分別在片段兩側(cè)進(jìn)行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達(dá)載體,所選擇的表達(dá)載體上應(yīng)具有 ?酶的酶切位點(diǎn)。(4)為檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況,可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的 ,用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。?答案 (1)細(xì)胞核(2)囊胚(3)核苷酸序列 HindⅢ和PstⅠ(4)蛋白質(zhì)解析 (1)核移植是把體細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中。(2)囊胚期才有內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。(3)可根據(jù)目的基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)引物,要把目的基因和表達(dá)載體直接連接,目的基因和表達(dá)載體應(yīng)具有相同酶的酶切位點(diǎn)。(4)欲檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況,需提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì),進(jìn)行抗原—抗體雜交實(shí)驗(yàn)。26.(2013福建理綜,33,10分)克隆豬成功率較低,與早期胚胎細(xì)胞的異常凋亡有關(guān)。Bcl-2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因,用PCR技術(shù)可以檢測(cè)該基因轉(zhuǎn)錄水平,進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞凋亡的關(guān)系?？寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)流程如圖。請(qǐng)回答:(1)圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來自 細(xì)胞,早期胚胎移入受體子宮后繼續(xù)發(fā)育,經(jīng)桑椹胚、囊胚和 胚最終發(fā)育為克隆豬。?(2)在PCR過程中可檢測(cè)出cDNA中Bcl-2cDNA的分子數(shù),進(jìn)而計(jì)算總mRNA中Bcl-2mRNA的分子數(shù),從而反映出Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平。①圖中X表示 過程。?②從基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢Bcl-2mRNA的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成 用于PCR擴(kuò)增,PCR擴(kuò)增過程第一輪循環(huán)的模板是 。?答案 (1)體原腸 (2)①反轉(zhuǎn)錄②引物Bcl-2cDNA解析 (1)圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來自良種豬的體細(xì)胞,胚胎發(fā)育過程中囊胚繼續(xù)發(fā)育形成原腸胚。(2)以mRNA為模板形成DNA的過程為反轉(zhuǎn)錄(或逆轉(zhuǎn)錄)。PCR擴(kuò)增的前提是需要有一段已知的核苷酸片段,以便根據(jù)這一序列合成引物。圖示可知,PCR擴(kuò)增過程第一輪循環(huán)的模板是以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成的cDNA,因引物是依據(jù)Bcl-2mRNA的核苷酸序列合成,故模板實(shí)際是其中的Bcl-2cDNA。
試題點(diǎn)評(píng)本題通過胚胎工程和基因工程的綜合知識(shí),主要考查學(xué)生對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的識(shí)記和理解應(yīng)用能力。27.(2012山東理綜,35,8分)毛角蛋白Ⅱ型中間絲(KIFⅡ)基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡(jiǎn)單流程如圖。(1)過程①中最常用的運(yùn)載工具是 ,所需要的酶是限制酶和 。?(2)在過程②中,用 處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞。在培養(yǎng)過程中,將成纖維細(xì)胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中,CO2的作用是 。?(3)在過程③中,用 處理以獲取更多的卵(母)細(xì)胞。成熟卵(母)細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行 處理。?(4)從重組細(xì)胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術(shù)是 。在胚胎移植前,通過 技術(shù)可獲得較多胚胎。?答案 (1)質(zhì)?！NA連接酶(2)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) 維持培養(yǎng)基(液)的pH(3)促性腺激素(或促濾泡素,孕馬血清) 去核(4)(早期)胚胎培養(yǎng) 胚胎分割解析 此題綜合考查基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程等知識(shí)。(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),一般需用同一種限制酶切割目的基因和載體,以產(chǎn)生相同黏性末端,并用DNA連接酶連接成重組表達(dá)載體。常用的載體是質(zhì)粒。(2)利用胰蛋白酶或膠原蛋白酶可將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需將細(xì)胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中,CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。(3)運(yùn)用超數(shù)排卵法可獲得更多的卵母細(xì)胞,常用的激素是促性腺激素或促濾泡素。成熟卵細(xì)胞在核移植前要進(jìn)行去核處理。(4)核移植時(shí)獲得的重組細(xì)胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng),可以獲得早期胚胎。為獲得更多胚胎,可以使用胚胎分割法。28.(2011福建理綜,32,10分)一對(duì)表現(xiàn)型正常的夫婦,生了一個(gè)鐮刀型細(xì)胞貧血癥(常染色體隱性遺傳病)患兒。在他們欲生育第二胎時(shí),發(fā)現(xiàn)妻子的雙側(cè)輸卵管完全堵塞,不能完成體內(nèi)受精。醫(yī)生為該夫婦實(shí)施了體外受精和產(chǎn)前基因診斷,過程如圖。請(qǐng)回答:(1)過程①是指在體外進(jìn)行的 處理,從而使精子與卵子結(jié)合形成受精卵;過程②稱為 。?
(2)在對(duì)胎兒進(jìn)行鐮刀型細(xì)胞貧血癥的產(chǎn)前基因診斷時(shí),要先從羊水中的胎兒細(xì)胞提取物質(zhì)③ 進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后用MstⅡ?qū)U(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行切割,產(chǎn)生多個(gè)片段的酶切產(chǎn)物。據(jù)此判斷,MstⅡ是一種 酶。?(3)不同長(zhǎng)度的酶切產(chǎn)物在電泳時(shí)移動(dòng)的速率不同,形成不同的電泳條帶。該家庭成員的鐮刀型細(xì)胞貧血癥基因分析的電泳帶譜如④,據(jù)此判斷該胎兒為 (正常/患者/攜帶者)。?答案 (1)精子獲能 胚胎移植(2)DNA 限制性核酸內(nèi)切(3)正常解析 分析題中過程圖可發(fā)現(xiàn):過程①指的是精子獲能處理,②則代表胚胎移植;在產(chǎn)前基因診斷時(shí),要先從羊水中的胎兒細(xì)胞提取DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后用限制性核酸內(nèi)切酶MstⅡ進(jìn)行切割,以得到多種不同長(zhǎng)度的酶切產(chǎn)物(基因);分析電泳帶譜可判斷,胎兒不含致病基因,表現(xiàn)應(yīng)該正常。【3年模擬】時(shí)間:30分鐘 分值:30分一、單項(xiàng)選擇題(每小題2分,共16分)1.(2021屆山東菏澤月考,14)如圖表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良的過程。下列分析錯(cuò)誤的是( )A.①過程需用纖維素酶和果膠酶的混合物處理B.②過程能定向誘導(dǎo)原生質(zhì)體產(chǎn)生具有優(yōu)良性狀的突變C.通過①③過程葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能D.④過程需用適宜配比的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素處理答案 B 2.(2020山東泰安4月聯(lián)考,12)對(duì)制備單克隆抗體與培育番茄—馬鈴薯的共同點(diǎn)表述不正確的是( )A.都利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性B.都可以用電融合法促融C.培養(yǎng)環(huán)境中都需要有適量的二氧化碳D.都需要用適宜種類的激素處理答案 D 3.(2020山東等級(jí)考模擬,14)下列關(guān)于單克隆抗體制備的說法,正確的是( )A.將特定抗原注射到小鼠體內(nèi),可以從小鼠血清中獲得單克隆抗體B.經(jīng)特定抗原免疫過的B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)可分泌單克隆抗體C.誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后,發(fā)生融合的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D.篩選出雜交瘤細(xì)胞后,需利用特定抗原再次篩選分泌單克隆抗體的細(xì)胞答案 D 4.(2020山東德州一模,20)抗PD-L1單克隆抗體能與癌細(xì)胞膜表面的PD-L1特異性結(jié)合,因而具有治療某些癌癥的作用。如圖是制備抗PD-L1單克隆抗體的示意圖,下列敘述錯(cuò)誤的是 ( )
A.在分離B淋巴細(xì)胞前,需要對(duì)小鼠注射PD-L1進(jìn)行免疫B.多孔玻璃板中的細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞和鼠瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞C.圖中細(xì)胞集落a~d既能大量繁殖,又能產(chǎn)生抗體D.圖中細(xì)胞集落a可用于擴(kuò)大化培養(yǎng)生產(chǎn)抗PD-L1單克隆抗體答案 B 5.(2020山東煙臺(tái)一模,13)隨著科學(xué)的發(fā)展和人們對(duì)生命科學(xué)的深入探索,生物科學(xué)技術(shù)會(huì)為人類的繁榮進(jìn)步做出更大的貢獻(xiàn)。下列關(guān)于生物科學(xué)技術(shù)的有關(guān)敘述,正確的是( )A.在植物體細(xì)胞雜交中,可采用質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)檢測(cè)制備的原生質(zhì)體的活性情況B.在生產(chǎn)單克隆抗體的過程中,不需要考慮B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞之間的免疫排斥C.利用動(dòng)物體細(xì)胞核移植的方法得到克隆動(dòng)物是培育新物種的一種方式D.設(shè)計(jì)試管嬰兒涉及體內(nèi)受精、胚胎移植等技術(shù)答案 B 6.(2020山東聊城一模,14)2018年中科院神經(jīng)科學(xué)研究所攻克了克隆靈長(zhǎng)類動(dòng)物這一世界難題,首次成功以體細(xì)胞克隆出了兩只獼猴——“中中”和“華華”,流程如圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )A.采集的卵母細(xì)胞應(yīng)該培養(yǎng)到MⅡ期B.過程①操作一般不晚于囊胚期C.克隆猴的性狀與核供體性狀完全相同D.克隆猴的成功說明動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性答案 C 7.(2020山東聊城開學(xué)檢測(cè),14)2019年1月24日,我國(guó)科學(xué)家宣布世界首批疾病克隆猴——5只生物節(jié)律紊亂體細(xì)胞克隆猴在中國(guó)誕生,開啟了克隆猴模型應(yīng)用于生命科學(xué)研究的“春天”。科學(xué)家采集了一只一歲半的、睡眠紊亂最明顯的BMAL1(生物節(jié)律基因)敲除猴A6的體細(xì)胞,通過體細(xì)胞核移植技術(shù),獲得了5只克隆猴,這是國(guó)際上首次成功構(gòu)建一批遺傳背景一致的生物節(jié)律紊亂獼猴模型。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 ( )A.體細(xì)胞核移植依據(jù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核的全能性B.5只克隆獼猴細(xì)胞核基因型與核供體細(xì)胞完全一致C.體細(xì)胞核移植需用取自新鮮卵巢的卵母細(xì)胞直接作受體細(xì)胞D.該研究可彌補(bǔ)實(shí)驗(yàn)獼猴繁殖周期長(zhǎng)、單胎數(shù)量少的不足答案 C 8.(2020山東菏澤一模,14)2020年初,荷蘭某研究所利用蛇干細(xì)胞培養(yǎng)出可分泌毒液的蛇毒腺微型組織,讓毒素的獲取途徑更加安全和簡(jiǎn)單。下列敘述正確的是( )A.培養(yǎng)蛇干細(xì)胞時(shí)O2的作用是維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定B.蛇毒腺微型組織基因的表達(dá)與蛇干細(xì)胞不完全相同C.利用蛇干細(xì)胞的大量增殖即可獲得大量分泌毒液的細(xì)胞D.培養(yǎng)蛇毒腺微型組織與哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件完全相同答案 B
二、不定項(xiàng)選擇題(每小題3分,共3分)9.(2020山東聊城一中4月線上模擬,20)如圖為細(xì)胞或原生質(zhì)體融合的簡(jiǎn)略過程。下列相關(guān)敘述中正確的是( )A.如果a和b分別是白菜和甘藍(lán)的體細(xì)胞,則需要用纖維素酶和果膠酶處理這兩種細(xì)胞B.如果d經(jīng)分裂分化形成的是有性雜交后代,則a和b融合形成d的過程是受精作用C.如果培養(yǎng)d可得到單克隆抗體,則細(xì)胞d既能無(wú)限增殖也能產(chǎn)生抗體D.將d培養(yǎng)成體細(xì)胞雜交植株的過程可以說明植物細(xì)胞具有全能性答案 ABCD 三、非選擇題(共11分)10.(2020山東日照一模,25)(11分)神經(jīng)纖毛蛋白-1(NRP-1)能在腫瘤細(xì)胞內(nèi)表達(dá),是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子家族成員的受體,通過參與多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)來促進(jìn)腫瘤血管的生成。研究人員從腫瘤細(xì)胞中擴(kuò)增出NRP-1基因并用其導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),分離提純相應(yīng)NRP-1,并用其免疫小鼠,以制備抗NRP-1的單克隆抗體(NRP-1MAb)。分析回答下列問題:(1)利用PCR技術(shù)可以從腫瘤細(xì)胞的基因組中分離擴(kuò)增得到完整的NRP基因,其原因是? 。?將擴(kuò)增后的目的基因構(gòu)建成表達(dá)載體后,導(dǎo)入用 處理的大腸桿菌體內(nèi)完成轉(zhuǎn)化。?(2)研究人員將免疫小鼠的脾中的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在該培養(yǎng)基上不能存活的是? 。?選取檢測(cè)抗體陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)需要的氣體環(huán)境是 。?(3)為進(jìn)一步確定NRP-1MAb靶向治療時(shí)的用藥方式,研究人員將直腸癌組織塊制成單細(xì)胞懸液,等量注入4組裸鼠右前腋下,接種后3天開始施加NRP-1MAb,每隔10天給藥1次,共4次。給藥后測(cè)算一次腫瘤體積,結(jié)果如圖所示:分析上圖可以得出的結(jié)論是? 。?根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請(qǐng)給出使用NRP-1MAb進(jìn)行靶向治療癌癥時(shí)的臨床建議: 。?答案 (1)使用與NRP-1基因兩端特異性結(jié)合的引物可以從模板DNA中擴(kuò)增出該基因 Ca2+ (2)B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞 95%的空氣和5%的CO2 (3)NRP-1MAb能有效降低腫瘤的體積,中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著 使用中劑量給藥
